EXPERIMENTACION EN QUIMICA ANALÍTICA

PRACTICAS

 

Practica	Título
Nº 1	DETERMINACIÓN ESPECTROFLUORIMÉTRICA DE QUININA EN AGUA TÓNICA
Nº 2	VALORACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE UNA MEZCLA DE YODURO Y CLORURO CON ION PLATA
Nº 3	DETERMINACIÓN CONJUNTA DE SULFAQUINOXALINA Y SULFAMETACINA MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRÍA
Nº 4	DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE FLUORUROS EN ENJUAGUES BUCALES
Nº 5	DETERMINACIÓN DE ANTIDEPRESIVOS MEDIANTE CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA PRESIÓN (HPLC)
Nº 6	DETERMINACION EXTRACTOESPECTROFOTOMÉTRICA DE AMARANTO Y ERITROSINA
Nº 7	DETERMINACIÓN DE Cu y Zn EN VINAGRE MEDIANTE ABSORCIÓN ATÓMICA
Nº 8	DETERMINACIÓN DE SODIO Y POTASIO EN AGUAS NATURALES MEDIANTE FOTOMETRÍA  DE EMISIÓN EN LLAMA

PROFESORES

 

 

 

PRACTICAS 

 

PRÁCTICA Nº 1

DETERMINACIÓN ESPECTROFLUORIMÉTRICA DE QUININA EN AGUA TÓNICA

 

PROCEDIMIENTO

• Preparar disoluciones de 100, 200, 300, 400 y 500 ppb a partir de una disolución de sulfato de quinina de 2.5 ppm y enrasar a 25 ml con H₂SO₄ 0.1 N.

• Registrar los espectros de excitación y emisión de una de las muestras y medir la intensidad de fluorescencia a 350 nm de excitación y 450 nm de emisión de todas ellas para construir la recta de calibrado.

• Pasar el contenido de un agua tónica a un vaso de precipitado y agitar vigorosamente a temperatura ambiente durante 10 minutos.

• Tomar 1.0 ml y añadir la cantidad necesaria de H₂SO₄ concentrado (36 N) para que en un volumen final de 250 ml sea 0.1 N.

• Registrar los espectros de excitación y emisión, comprobando que en estas condiciones la fluorescencia del agua tónica es debida únicamente a la quinina.

• Medir la fluorescencia a 350 nm de excitación y 450 nm de emisión calculando la concentración de quinina en el agua tónica a partir de la recta de calibrado.

 

  

PRÁCTICA Nº 2

VALORACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE UNA MEZCLA DE YODURO Y CLORURO CON ION PLATA

 

PROCEDIMIENTO

• Conectar  el  potenciómetro  a  la  red  y  colocarlo   en   fase   de calentamiento de acuerdo con las instrucciones.

• Preparar e instalar los electrodos de acuerdo con las instrucciones.

• Pipetear 10 ml. de disolución problema a valorar e  introducirlos  en un vaso de precipitados de 500 ml. diluyendo con agua hasta unos 300 ml.

• Colocar en el interior del vaso un núcleo agitador e instalar todo  el sistema de agitación.

• Llenar la bureta con la disolución de AgNO₃   0.1  N  e  instalarla  de forma que su pico toque la disolución a valorar.

• Conectar el agitador a la red y  mantener  una  agitación  suave  pero persistente durante toda  la  valoración,  interrumpiéndola  solamente para la lectura del potencial.

• Introducir los electrodos (Ag-calomelanos) en el vaso de forma que  no puedan ser rozados por el núcleo agitador.

• Colocar el mando en mV y leer el valor de mV en este momento.

• Añadir, desde la bureta, sucesivas porciones conocidas de AgNO₃  0.1  N  y tras un breve tiempo de agitación leer lo que marca el aparato.

• Representar gráficamente sobre papel milimetrado:

                   a)Variación del potencial (E) en función del  volumen  (V)  de  AgNO₃  añadido.

                   b) Primera derivada.

                   c) Segunda derivada.

• Deducir de las gráficas el volumen  de  equivalencia  y  realizar  los cálculos oportunos para expresar la concentración de Cl ^-  y  I^-   de  la mezcla.

  

 

PRÁCTICA  Nº 3

DETERMINACIÓN CONJUNTA DE SULFAQUINOXALINA Y SULFAMETACINA MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRÍA

 

OBJETO

• Demostrar el uso de la espectrofotometría UV en el análisis de mezclas de dos componentes, utilizando sus respectivos máximos de absorción.

PROCEDIMIENTO

• Preparar dos disoluciones madres de 100 mg/L una de Sulfaquinoxalina (SQX, 50% etanol) y otra de Sulfametacina (SMT, 50% etanol), disolviendo aproximadamente 10 mg de cada una de las drogas en 100 mL de volumen final.

• A partir de las disoluciones madres, por dilución, preparar en matraces de 25 mL disoluciones de 4, 8, 12 y 16 mg/L de cada una de las sulfamidas, añadiendo en todos los casos 5 mL de disolución tampón NH₄Cl/NH₃ 0.5 M de pH = 10 y mantener el porcentaje de etanol constante, teniendo en cuenta el contenido de etanol de la muestra más concentrada.

• Preparar un blanco en las mismas condiciones que el resto de las muestras (% de etanol y tampón). 

• Registrar los espectros de absorción de cada una de las disoluciones preparadas anteriormente frente al  blanco  y en el rango de longitudes de onda comprendido entre 200 y 315 nm a una velocidad de barrido de 600 nm/min.  nm.

• Una vez obtenidos los espectros de absorción, buscar las dos longitudes de onda de interés, para el establecimiento del sistema de ecuaciones posterior (aquellas en que los espectros de las dos sulfamidas presenten una absorbancia elevada). 

• Comprobar que para las longitudes de onda seleccionadas y en el rango de concentración estudiado la respuesta es de tipo lineal. Si esto es así, obtener el valor medio de la absortividad de cada una de las sulfamidas a las longitudes de onda seleccionadas y comparar con los valores obtenidos a partir de las      ecuaciones de las rectas de calibrado.

• Registrar el espectro de absorción de una mezcla problema de SQX y SMT y calcular la concentración de cada una de las drogas usando un sistema de ecuaciones.

  

  

PRÁCTICA Nº 4

DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE FLUORUROS EN ENJUAGUES BUCALES

 

FUNDAMENTO

• El electrodo selectivo de fluoruros se emplea ampliamente en la determinación de fluoruros en una gran diversidad de materiales.

• Un requisito necesario para su correcta utilización es la necesaria utilización de una disolución amortiguadora de la fuerza iónica total (TISAB) para ajustar todos los estándares y las muestras problemas a prácticamente la misma fuerza iónica; cuando este reactivo se usa, se mide más la concentración de fluoruro que su actividad.

• El pH del amortiguador es alrededor de 5, un nivel al cual el ión F es la especie predominante en las especies que contienen flúor.

• El amortiguador también contiene ácido ciclohexilamino-dinitrilotetraacético, el cual forma quelatos estables con Fe (III) y Al (III), liberando el ión fluoruro de sus complejos con estos cationes.

 

PROCEDIMIENTO

• En matraces de plástico de 25.0 mL, preparar disoluciones conteniendo concentraciones conocidas de F, variables entre 1 y 5 mg/L, adicionando 10 mL de la disolución TISAB y enrasando con agua desionizada.

• Se determina el potencial de cada una de ellas y se construye la recta de calibrado representado el valor del potencial frente al logaritmo de la concentración de fluoruros.

• A continuación y sobre un matraz de plástico de 25.0 mL se añade 0,2 mL de la disolución problema (enjuague bucal), 10 mL de TISAB y enrasando con agua desionizada, agitar bien y medir el potencial, calculando a continuación los mg/L de la disolución comercial analizada.

 

  

PRÁCTICA Nº 5

DETERMINACIÓN DE ANTIDEPRESIVOS MEDIANTE CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA PRESIÓN (HPLC)

 

OBJETO

• El objeto de esta práctica es la separación y determinación de tres  antidepresivos pertenecientes al grupo de los inhibidores de la recaptación de serotonina: fluoxetina, fluvoxamina y trazodona mediante HPLC.

• La modalidad utilizada en este caso es cromatografía líquida de partición con fases ligadas y en  fase inversa.

• La elución de los compuestos depende de su naturaleza química y las condiciones cromatográficas utilizadas.

• En esta práctica la columna utilizada es de fases ligadas apolar, de 5 µm de tamaño de partícula y de 15 cm de longitud.

• Los componentes eluidos son detectados a una longitud de onda a la cual los compuestos estudiados presentan una absorbancia considerable

• Las condiciones de trabajo son las siguientes:

                        FASE MÓVIL: Acetonitrilo: 75 mM tampón fosfato pH=2.5 (40:60).

                        COLUMNA: C₁₈

                        FLUJO: 1.5 mL/min.

                        DETECCIÓN: 230 nm

 

EXPERIMENTAL

• Preparación los patrones para la obtención de las rectas de Calibrado

En matraces de 5 mL se preparan disoluciones que contenga 4, 6, 8 y 10 ppm de cada uno de los compuestos, a partir disoluciones  de 100 ppm de cada antidepresivo en agua desionizada.

• Preparación de la muestra problema

Tomar 1 ml del preparado farmacéutico y diluirlo 100 veces con agua desionizada (calidad Milli-Q) para obtener la disolución “A”. Una fracción de la disolución “A” se vuelve a diluir 5 veces con agua desionizada en un matraz de 10 ml, obteniendo la disolución “B”. Por último, una fracción de la disolución “B” se introducirá en el cromatógrafo de líquidos.

• Procedimiento

En las condiciones instrumentales y químicas seleccionadas se procede a la obtención de los cromatogramas correspondientes a las disoluciones del calibrado y de la muestra problema. Una vez obtenidos, se construye la correspondiente recta de calibrado de cada antidepresivo  y a partir de ellas se calcula la concentración del principio activo en la muestra problema.

 

RESULTADOS

• A partir del cromatograma correspondiente a uno de los  patrones, calcular:

             - Eficiencia para cada compuesto (N).

             - Factor de capacidad (K’).

             - Factor de separación.

             - Resolución cromatográfica entre los dos picos obtenidos.

• Calcular la concentración de ácido gálico y gentísico en mg/L en el aceite analizado. 

 

  

PRÁCTICA  Nº 6

DETERMINACION EXTRACTOESPECTROFOTOMÉTRICA DE AMARANTO Y ERITROSINA

 

OBJETO

• El objeto de esta práctica es la determinación simultánea de dos colorantes: Amaranto y Eritrosina en una bebida.

• En primer lugar se realiza una separación previa de estos compuestos mediante extracción líquido-liquido utilizando metil-isobutilcetona para extraer Eritrosina permaneciendo el Amaranto en fase acuosa.

• Posteriormente se determina cada colorante mediante medidas espectrofotométricas en el máximo de absorción.

RECTAS DE CALIBRADO

• En matraces de 25 mL se adicionan volúmenes variables de la disolución patrón de Eritrosina y Amaranto de manera que la concentración de cada uno de ellos sea 2, 4, 6, 8 y 10 mg/L, etanol  hasta que el contenido total sea de 25% del volumen final, 2.5 mL de tampón HAc/Ac^- de pH = 4.8 y agua destilada hasta enrase.

• Transferir 10 mL de cada una de las disoluciones a embudos de decantación de 100 mL y adicionar sobre estos 10 mL de metil-isobutilcetona. Agitar los embudos durante 2 minutos depositar los embudos en sus soportes, separar las fases y centrifugar la fase orgánica.

• Realizar los espectros de absorción de cada una de las fases para uno de los calibrados y seleccionar las longitudes de onda correspondientes a los máximos de absorción.

• Para las demás disoluciones medir la absorbencia de la fase acuosa y orgánica a las longitudes de onda seleccionadas.

• Se calcula el contenido de cada compuesto en mg/L en la muestra problema mediante las rectas de calibrado.

 

PRÁCTICA Nº 7

DETERMINACIÓN DE Cu y Zn EN VINAGRE MEDIANTE ABSORCIÓN ATÓMICA

 

PRINCIPIO

• Determinación directa por espectrofotometría de absorción atómica

PROCEDIMIENTO

• Preparación de las muestras de vinagres : No se necesita preparación especial. En caso de elevada concentración realizar una o varias diluciones hasta quedar dentro del rango de medida.

• Determinación: Diluir partes alicotas de las disoluciones de Cu o Zn (250 mg/L) con ácido acético al 5% para obtener soluciones de Cu de  0.25; 0.5;  2.0 y 5.0 mg/L y de Zn de  0.25; 0.5; 1.0 y 2.0 mg/L. Aspirar las soluciones patrón y construir las correspondientes rectas de calibrado. Las  longitudes de onda de medida serán 213,8 nm para el Zn y 324,8 nm para el Cu.

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

• Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos, hallar las concentraciones de Zn y Cu en las muestras de los distintos vinagres.     

 

  

 

 

PRÁCTICA Nº 8

DETERMINACIÓN DE SODIO Y POTASIO EN AGUAS NATURALES MEDIANTE FOTOMETRÍA  DE EMISIÓN EN LLAMA

 

PRINCIPIO

• Se pueden determinar cantidades traza de sodio y potasio por fotometría de emisión de llama a las longitudes de onda de 589.0 y 766.5 nm, respectivamente.

• Se pulveriza la muestra en una llama aire-acetileno y la excitación se realiza en condiciones controladas y reproducibles.

PROCEDIMIENTO

• Preparar una serie de disoluciones en matraces de 25 mL de 1, 3, 7 y 19 mg/L de Na y K respectivamente, para establecer las correspondientes curvas de calibración.

• Medir la intensidad de radiación emitida por los patrones de sodio y las muestras a 589.0 nm.

• Por referencia directa a la curva de calibración calcular la concentración de sodio expresada en mg/L de las muestras.

• Para la determinación de potasio, proceder igual que en la determinación de sodio, midiendo la emisión a 766.5 nm. 

 

Ultima actualización : 17/12/2009 12:30:28